衰老是一个亘古至今的话题。衰老吗?”。而如何“度量”衰老，精准地衡量衰老阶段和程度是发展健康监测、个性化医疗和评估衰老干预效果的重要依据和前提。同发育过程的高度程序化不同，衰老的速度和程度存在高度异质性。例如，生活中有些看起来比同龄人更年轻，而有些人看起来更老，这让我们意识到，人类的“时序年龄 (Chronological Age)或称为“日历年龄”、“身份证年龄”，往往并不能直接与其生物学年龄 (Biological Age) 划等号。我们究竟有多老? 有没有一把可以度量衰老的尺子? 如何判断一个人是未老先衰还是老当益壮? 如何预测器官退变的关键时间节点?如何评价不同衰老干预手段的效果? 面对这些与衰老转化研究密切相关的问题，需建立能够评估人类生物学年龄的“衰老时钟”

另一方面，衰老是一个受多因素影响的复杂过程。尽管目前已有研究尝试从不同的单一维度对衰老进行度量，然而衰老的复杂性和异质性决定了单一层次的衰老时钟存在着固有的局限。至今尚未建立系统整合跨宏微观及多维度参数的人类生物学年龄评估体系，这严重制约了衰老评估、预警和干预领域的发展及其临床转化应用。此外，衰老过程具有明显的性别差异。女性在衰老机制和动力学上都与男性有很大的区别。迄今为止，针对女性的系统衰老研究，特别是专门的女性衰老时钟研究还罕有报道。

2023年7月28日，中国科学院动物研究所刘光慧研究员、中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心)张维绮研究员、衢州市人民医院张峰研究员、中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心)杨运桂研究员合作在Med杂志在线发表题为“Determining a Multimodal Aging Clock in a Cohort of ChineseWomen”的研究论文。该研究首次系统挖掘了中国女性衰老跨5个维度的生物学标志物，建立了中国女性的多层次复合时钟，并利用该时钟系统揭示了中国女性衰老的动态变化规律以及激素替代疗法对于女性衰老的潜在干预效果。该研究建立并丰富了人群哀老的系统生物医学研究范式，为衰老时钟的发展和临床应用提供了坚实基础。

该研究首先在浙江省衢州市建立了涵盖20-66岁中国女性的自然人群队列，志愿者入选条件为长期在当地居住，无重大疾病，并在受试前对其饮食和作息进行统一建议，这降低了增龄外因素对研究带来的不确定性影响。利用多参数表型组、(单细胞)转录组、蛋白组、代谢组和微生物组等手段，结合人工智能等分析方法，研究系统探究了中国女性衰老的多维特征，鉴定了一系列具有临床转化价值的新型衰老生物标志物。在表型水平，人的动作灵活性和手脑协作能力等行动协调能力随着增龄显著降低，血清中的卵泡刺激激素(FSH)、促黄体激素(LH)随增龄显著升高，而抗缪勒氏激素 (AMH)水平则与年龄呈负相关。在转录水平，研究人员发现血液中幼稚态T细胞的减少和毒性T细增加是免疫细胞亮老的主要特征，并鉴定到LRRN3、CACHD1、SATB1二个可能指征年龄相关的幼稚态T细胞减少的基因。而在蛋白层次，该研究揭示了血浆中载脂蛋白(如APOE、APOC4)和炎症相关蛋白(如CHIT1、LLRA2) 的上调与增龄高度正相关，其中载脂蛋白的升高可能指示了人类肝衰老的程度。在代谢层次，研究人员观察到老年人血浆中主要发生了脂质的积累和类固醇激素相关代谢物的减少。此外研究还发现补充随增龄下调的血浆代谢物(如豆酸、戊酸等)能够显著延缓人动脉内皮细胞衰老、改善内皮细胞的功能，提示了这些代谢物具有干预人类血管衰老的潜力。

通过整合衰老多组学数据，研究人员发现中国女性健康状态增龄伴随的三个方面显著变化: 炎症激活、激素调节素乱以及多组织功能退化(主要表现为骨密度丢失、肺功能降低和肝损伤退行标志物积累等)。基于所得到的人群多组学数据集，研究人员进一步建立了中国女性的多维衰老时钟，包括面部时钟、表型时钟、转录时钟蛋白时钟和代谢时钟。该研究同时还创新性地建立并应用了具有特定功能注释的衰老时钟，包括激素时钟、免疫时钟、脂质时钟和组织衰老时钟(包括肝脏、肌肉、神经系统和造血系统)。通过系统比较不同种类衰老时钟研究人员发现相较于其他单层次衰老时钟，多维复合衰老时钟具有更高的预测准确性，并且激素衰老时钟与多种衰老时钟具有较高相关性，提示激素变化与女性衰老的多个方面具有密切联系。

此外，该研究通过比较不同年龄段人群的衰老动力学曲线，发现受试女性在30岁和50岁两个时间点具有明显的衰老变化加剧的动力学特征。其中，30岁左右的衰老变化主要表现为代谢水平的脂质累积和类固醇减少。而到50岁左右时，女性衰老进程在器官、细胞和分子等多个层次均发生剧烈变化，包括多种增龄高度相关指标的陡于或陡降。值得注意的是，由于30岁和50岁大致对应了志愿者生育和更年期的分界点，这些事件可能导致女性内分泌水平发生较大波动，该结果再一次说明激素水平的改变可能是女性衰老的关键影响因素。

为验证多维衰老时钟对于衰老干预评估的应用能力，研究人员将经历长期激素替代疗法的志愿者和同年龄段末接受过治疗的人群进行观察比较，发现接受激素替代疗法的志愿者的多个衰老参数得到一定程度的缓解，包括幼稚态CD8 T细胞的增加和炎症蛋自、肝损伤标志物的降低等。相对应的，这些志愿者的激索时钟、免疫时钟.蛋白时钟和代谢时钟等多种亮老时钟的速率也表现出不同程度的缓解趋势。这一结果说明该研究建立的衰老时钟具有评价衰老干预手段的临床应用价值。

综上，该研究首次建立了中国女性的多维衰老标志物景观图，在群体水平详细剖析了女性不同层次的衰老特征，创新性地建立了中国女性的复合衰老时钟，并证明了这些时钟具有评价人类衰老干预效果的潜力 (图1)。利用交叉学科手段，该研究从衰老的监测、度量和干预三个角度进行了探究，为人类复合衰老时钟的建立和发展提供了宝贵的范式和资源。以这些研究为基础，通过扩大人群数量和地域范围，并结合前沿数据采集和分析技术未来将有望从系统维度解析中国人群的衰老特征，建立评估人类生理年龄的衰老指数(ndex of Chinese AgingScore,iCAS)，助力系统老年医学的发展。这些精准衰老度量手段的建立，将有助于制定人性化的临床健康指导方案，发展针对特定老年疾病的精准预警和诊疗策略，为推动健康老龄化的战略需求提供支撑保障。

中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心)博士研究生李嘉明、熊沐钊、衢州市人民医院傅向红主任医师、中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心)范艳玲助理研究员和北京邮电大学董辰教授为文章的共同第一作者。中国科学院动物研究所刘光慧研究员、中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心)张维绮研究员、衢州市人民医院张峰研究员、中国科学院北京基因组研究所(国家生物信息中心)杨运桂研究员为文章的共同通讯作者。

原文链接: https://doi.org/10.1016/j.medj.2023.06.010

图1. 中国女性衰老时钟的建立及其应用